SAŽETAK I OBJAŠNJENJE TESTA
Proljev je jedan od glavnih uzroka morbiditeta i mortaliteta djece u cijelom svijetu, što rezultira s 2,5 milijuna smrti godišnje.Infekcija rotavirusom je vodeći uzrok teškog proljeva u dojenčadi i djece mlađe od pet godina, čineći 40%-60% akutnog gastroenteritisa i uzrokujući procijenjenih 500.000 smrtnih slučajeva u djetinjstvu svake godine.Do dobi od pet godina gotovo svako dijete na svijetu bilo je barem jednom zaraženo rotavirusom.S naknadnim infekcijama izaziva se širok, heterotipski odgovor protutijela;stoga su odrasli rijetko pogođeni.
Do danas je izolirano sedam skupina rotavirusa (skupine AG) i
okarakteriziran.Rotavirus skupine A, najčešći rotavirus, uzrokuje više od 90% svih rotavirusnih infekcija kod ljudi.Rotavirus se prvenstveno prenosi fekalnim putem, izravno s osobe na osobu.Titri virusa u stolici dosežu maksimum ubrzo nakon početka bolesti, a zatim opadaju.Razdoblje inkubacije rotavirusne infekcije obično traje jedan do tri dana, nakon čega slijedi gastroenteritis koji u prosjeku traje od tri do sedam dana.Simptomi bolesti variraju od blagog, vodenastog proljeva do teškog proljeva s vrućicom i povraćanjem.
Dijagnoza infekcije rotavirusom može se postaviti nakon dijagnoze gastroenteritisa kao uzroka teškog proljeva u djece.Nedavno je specifična dijagnoza infekcije rotavirusom postala dostupna otkrivanjem antigena virusa u stolici metodama imunološkog ispitivanja kao što je test lateks aglutinacije, EIA i kromatografski imunološki test s lateralnim protokom.
Rotavirus Ag Rapid Test je kromatografski imunološki test s bočnim protokom koji koristi par specifičnih protutijela za kvalitativno otkrivanje antigena rotavirusa u fekalnom uzorku.Test je moguće izvesti bez glomazne laboratorijske opreme, a rezultati su dostupni unutar 15 minuta.
NAČELO
Brzi test Rotavirus Ag je kromatografski imunološki test s bočnim protokom.Testna traka sastoji se od: 1) jastučića konjugiranog tamnocrvene boje koji sadrži monoklonska anti-rotavirusna protutijela konjugirana s koloidnim zlatom (anti-rotavirusni konjugati) i kontrolnog protutijela konjugiranog s koloidnim zlatom, 2) trake s nitroceluloznom membranom koja sadrži testnu liniju (T linija) i kontrolna linija (C linija).Linija T je prethodno obložena drugim monoklonskim antitijelom protiv rotavirusa, a linija C je prethodno obložena antitijelom kontrolne linije
Kada se odgovarajući volumen ekstrahiranog uzorka rasporedi u jažicu za uzorak testne kasete, uzorak migrira kapilarnim djelovanjem preko kasete.Rotavirus Ag, ako je prisutan u uzorku, vezat će se na anti-rotavirusne konjugate.Imunokompleks se zatim hvata na membrani pomoću prethodno obloženog rotavirusnog antitijela formirajući bordo obojenu T liniju, što ukazuje na pozitivan rezultat testa na rotavirus. Odsutnost T linije sugerira da je koncentracija rotavirus Ag u uzorku ispod razine koja se može detektirati, što ukazuje na negativan rezultat na rotavirus.Test sadrži unutarnju kontrolu (linija C), koja bi trebala pokazati bordo obojenu liniju imunokompleksa kontrolnih protutijela, bez obzira na razvoj boje na liniji T.U suprotnom, rezultat testa je nevažeći i uzorak se mora ponovno testirati drugim uređajem.
