SAŽETAK I OBJAŠNJENJE TESTA
Leptospiroza se javlja diljem svijeta i čest je blagi do ozbiljan zdravstveni problem za ljude i životinje, osobito u područjima s vrućom i vlažnom klimom.Prirodni rezervoari leptospiroze su glodavci, kao i veliki broj domaćih sisavaca.Infekciju ljudi uzrokuje L. interrogans, patogeni član roda Leptospira.Infekcija se prenosi urinom životinje domaćina.
Nakon infekcije, leptospire su prisutne u krvi dok se ne očiste nakon 4 do 7 dana nakon proizvodnje anti-L.interrogans antitijela, u početku klase IgM.Kultura krvi, urina i cerebrospinalne tekućine učinkovito je sredstvo za potvrdu dijagnoze tijekom 1. do 2. tjedna nakon izlaganja.Serološka detekcija antiL.interrogans protutijela također je uobičajena dijagnostička metoda.Testovi su dostupni u ovoj kategoriji: 1) Test mikroskopske aglutinacije (MAT);2) ELISA;3) Indirektni fluorescentni testovi na antitijela (IFAT).Međutim, sve gore navedene metode zahtijevaju sofisticirano postrojenje i dobro obučene tehničare.
Leptospira IgG/IgM je jednostavan serološki test koji koristi antigene iz L. interrogans i otkriva IgG i IgM antitijela na te mikroorganizme istovremeno.Test može izvesti neobučeno ili minimalno kvalificirano osoblje, bez glomazne laboratorijske opreme, a rezultat je dostupan unutar 15 minuta.
NAČELO
Leptospira IgG/IgM brzi testni komplet je kromatograf s bočnim protokom
imunotest.Testna kazeta sastoji se od: 1) jastučića konjugata tamnocrvene boje koji sadrži rekombinantne antigene L. interrogans konjugirane s koloidnim zlatom (konjugati Leptospira) i konjugati zečjeg IgG-zlata, 2) traka s nitroceluloznom membranom koja sadrži dvije testne trake (M i G trake) i kontrolni pojas (C pojas).M traka je prethodno presvučena monoklonskim anti-humanim IgM za detekciju anti-L.. interrogans IgM, G traka je prethodno presvučena reagensima za detekciju anti-L.interrogans IgG, a C traka je prethodno obložena kozjim anti-zečjim IgG.
Kada se odgovarajući volumen ispitnog uzorka rasporedi u jažicu za uzorke u kazeti, uzorak migrira kapilarnim djelovanjem preko kazete.IgM anti-L.. interrogans, ako je prisutan u uzorku, vezat će se na konjugate Leptospira.Imunokompleks je zatim zarobljen na membrani pomoću prethodno obloženog anti-humanog IgM antitijela, tvoreći bordo obojenu M traku, što ukazuje na pozitivan rezultat L. interrogans IgM testa.IgG anti-L.. interrogans, ako je prisutan u uzorku, vezat će se na konjugate Leptospira.Imunokompleks je tada zarobljen prethodno obloženim reagensima na membrani, tvoreći bordo obojenu G traku, što ukazuje na pozitivan rezultat testa L. interrogans IgG.
Odsutnost ispitnih vrpci (M i G) ukazuje na negativan rezultat.Test sadrži unutarnju kontrolu (C vrpca) koja bi trebala pokazivati bordo obojenu vrpcu imunokompleksa kozjeg anti-zečjeg IgG/zečjeg IgG-gold konjugata bez obzira na razvoj boje na bilo kojoj od testnih vrpci.U suprotnom, rezultat testa je nevažeći i uzorak se mora ponovno testirati drugim uređajem.
